COVID-19-ի ախտորոշման լաբորատոր թեստերը ներկայումս պրակտիկայում, ինչպես խորհուրդ են տալիս փորձագետների միջազգային մարմինները, վերանայվում և գնահատվում են:
COVID-19 հիվանդություն, որը ծագել է Չինաստանի Ուհանից, մինչ այժմ ազդել է ավելի քան 208 երկրների վրա։ Ողջ աշխարհում գիտական հանրությանը վերջին մի քանի ամիսների ընթացքում առաջացել է զգալի մարտահրավեր՝ զարգանալ ախտորոշիչ թեստեր համար Covid-19 հիվանդության հայտնաբերում` հիվանդներին և կասկածելի անձանց զննելու նպատակով` համաճարակը արդյունավետ կառավարելու և վերահսկելու նպատակով:
Նախքան COVID-19-ի հայտնաբերման համար օգտագործվող ընթացիկ մեթոդներն ու գործելակերպերը գնահատելը, նախ եկեք հասկանանք, թե ինչն է առաջացնում COVID-19-ը և ինչպես կարելի է ախտորոշիչ թեստեր մշակել՝ հիվանդներին այս հիվանդության համար հետազոտելու համար: COVID-19 հիվանդությունը պայմանավորված է դրական շղթայված ՌՆԹ-ով վիրուս որոնք զոոնոզ են, ինչը նշանակում է, որ նրանք կարող են հատել տեսակների արգելքները կենդանիներից մինչև մարդ, և կարող են մարդկանց մոտ առաջացնել հիվանդություններ՝ սկսած սովորական մրսածությունից մինչև ավելի ծանր հիվանդություններ, ինչպիսիք են MERS-ը և SARS-ը: COVID-19 առաջացնող վիրուսն այժմ ստացել է SARS-CoV-2 անվանումը Վիրուսների տաքսոնոմիայի միջազգային կոմիտեի կողմից (ICTV), քանի որ այն շատ նման է SARS-ի բռնկման (SARS-CoVs) առաջացրած վիրուսին: COVID-19 հիվանդության ախտորոշիչ թեստը կարող է մշակվել մի քանի եղանակներով։
Աշխարհում ամենատարածված և ներկայումս ընդունված մեթոդը ախտորոշիչ թեստի մշակումն է, որը կարող է հայտնաբերել SARS-CoV-2 վիրուսը: Սա փորձարկում հիմնված է հիվանդի նմուշում վիրուսային գենոմի հայտնաբերման վրա RT-real time PCR-ով (հակադարձ տրանսկրիպտազա-իրական ժամանակի պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա): Սա ենթադրում է վիրուսային ՌՆԹ-ի փոխակերպում ԴՆԹ-ի, օգտագործելով հակադարձ տրանսկրիպտազ կոչվող ֆերմենտը, այնուհետև ԴՆԹ-ի ամպլիֆիկացումը՝ օգտագործելով պրայմերների հատուկ հավաքածու և լյումինեսցենտային զոնդ, որը կապվում է վիրուսային ԴՆԹ-ի որոշակի հատվածին՝ օգտագործելով Taq պոլիմերազը և հայտնաբերելով լյումինեսցենտային ազդանշանը: Այս թեստերը կոչվում են NAATs (Nucleic Acid Amplification Tests): Այս տեխնիկան կարող է շատ օգտակար լինել հիվանդի նմուշում նուկլեինաթթվի առկայության շատ վաղ հայտնաբերման համար, նույնիսկ ասիմպտոմատիկ հիվանդների մոտ, որոնք չեն ցուցաբերում COVID-19 հիվանդության ախտանիշներ (հատկապես 14-28 օր ինկուբացիոն շրջանում) և ավելի ուշ: ինչպես նաև այն դեպքում, երբ հիվանդությունը լիարժեք է:
Աշխարհի տարբեր ընկերություններ վերջին մի քանի ամիսների ընթացքում աշխատել են ժամանակի դեմ մրցավազքի մեջ՝ մշակելու NAAT-ի վրա հիմնված SARS-CoV-2-ի հայտնաբերման ախտորոշիչ թեստ՝ հիմնված CDC-ի (Հիվանդությունների վերահսկման կենտրոնի), Ատլանտայի, ԱՄՆ-ի և ԱՀԿ ուղեցույցների վրա: 1, 2): Ամբողջ աշխարհի առողջապահական մարմինները հաստատել են այս թեստերը՝ SARS-CoV-2-ի հայտնաբերման համար արտակարգ իրավիճակների օգտագործման համար: Մինչ այժմ թիրախավորված վիրուսային գեները ներառում են N, E, S և RdRP գեները՝ համապատասխան դրական և բացասական վերահսկման հետ միասին: Նման հետազոտության համար հավաքվող հիվանդի նմուշները վերին շնչուղիներից են (նզոֆարինգային և օրոֆարինգալային շվաբր) և/կամ ստորին շնչուղիներից (խորխ և/կամ էնդոտրախեալ ասպիրատ կամ բրոնխոալվեոլային լվացում): Այնուամենայնիվ, հնարավոր է նաև վիրուս հայտնաբերել այլ նմուշներում, ներառյալ կղանքը և արյունը: Նմուշները պետք է արագ հավաքվեն համապատասխան ձևով՝ հաշվի առնելով բոլոր անհրաժեշտ նախազգուշական միջոցները և պահպանելով կենսաանվտանգության պրակտիկաները (համաձայն ԱՀԿ-ի կողմից սահմանված ուղեցույցների[1]), այն հիվանդներից, որոնք համապատասխանում են COVID-19-ի կասկածելի դեպքի սահմանմանը, պահպանելով և փաթեթավորելով այն։ լավ, եթե այն պահանջում է արագ տեղափոխել ախտորոշիչ կենտրոն և այնուհետև մշակել (ՌՆԹ-ի արդյունահանում կենսաանվտանգության պահարանում BSL-2 կամ համարժեք հաստատությունում) այնպես, որ ապահովվի նմուշի ամբողջականությունը: Այս ամենը պետք է իրականացվի առաջնահերթության հիման վրա՝ ավելի լավ կլինիկական կառավարման և բռնկման վերահսկման համար:
Աշխարհի խոշոր ախտորոշիչ ընկերությունների կողմից մշակված NAAT-ի վրա հիմնված տարբեր թեստերի հայտնաբերման ժամանակը տատանվում է 45 րոպեից մինչև 3.5 ժամ: Տարբեր բարելավումներ են արվում այս թեստերում՝ դրանք վերածելու խնամքի թեստերի և հնարավորինս քիչ ժամանակում ցանկալի արդյունքների հասնելու համար՝ առանց արդյունքի ճշգրտությունը խախտելու, մեկ օրվա ընթացքում կատարվող թեստերի քանակն ավելացնելու համար:
Ախտորոշիչ թեստի այլ տարբերակներ են արագ ախտորոշիչ թեստեր (RDT) որոնք կամ հայտնաբերում են վիրուսային անտիգեններ/սպիտակուցներ, որոնք արտահայտված են SARS-CoV-2 վիրուսի մասնիկների մակերեսին, քանի որ դրանք բազմանում են հյուրընկալող բջիջներում և առաջացնում հիվանդություն կամ հյուրընկալող հակամարմիններ՝ ի պատասխան վարակի. այս թեստը հայտնաբերում է հակամարմինների առկայությունը այն մարդկանց արյան մեջ, ովքեր ենթադրաբար վարակված են եղել COVID-19-ով (3):
Վիրուսային անտիգենները հայտնաբերելու համար RDT-ի ճշգրտությունն ու վերարտադրելիությունը կախված է մի քանի գործոններից՝ ներառյալ հիվանդության սկզբից սկսած ժամանակը, նմուշում վիրուսի կոնցենտրացիան, նմուշի որակը և մշակումը և թեստային փաթեթներում առկա ռեակտիվների ձևակերպումը: Այս փոփոխականների շնորհիվ այս թեստերի զգայունությունը կարող է տատանվել 34%-ից մինչև 80%: Այս տարբերակի հիմնական թերությունն այն է, որ վիրուսը պետք է լինի իր վերարտադրողական և վարակիչ փուլում՝ վիրուսային սպիտակուցները հայտնաբերելու համար:
Նմանապես, հյուրընկալող հակամարմինները հայտնաբերող թեստերը հիմնված են հակամարմինների արձագանքի ուժի վրա, որը կախված է այնպիսի գործոններից, ինչպիսիք են տարիքը, սննդային կարգավիճակը, հիվանդության ծանրությունը և որոշ դեղամիջոցներ կամ վարակներ, որոնք ճնշում են իմունային համակարգը: Այս տարբերակի հիմնական թերությունն այն է, որ հակամարմինները արտադրվում են SARS-CoV-2 վիրուսով վարակվելուց օրերից մինչև շաբաթներ անց, և թեստը կատարելու համար պետք է սպասել այդքան երկար: Սա նշանակում է, որ հյուրընկալող հակամարմինների արձագանքի հիման վրա COVID-19 վարակի ախտորոշումը հաճախ հնարավոր կլինի միայն վերականգնման փուլում, երբ կլինիկական միջամտության կամ հիվանդության փոխանցման կանխարգելման շատ հնարավորություններ արդեն անցել են։
Ներկայումս վերը նշված RDT-ները հաստատվել են միայն հետազոտական միջավայրում և ոչ կլինիկական ախտորոշման համար՝ տվյալների բացակայության պատճառով (3, 4): Քանի որ ավելի ու ավելի շատ համաճարակաբանական տվյալներ են դառնում COVID-19-ի համար, ավելի շատ RDT-ներ կմշակվեն և կհաստատվեն որպես խնամքի թեստեր կլինիկական միջավայրում, քանի որ դրանք կարող են արդյունքներ տալ 10-30 րոպեում, ի տարբերություն NAAT-ի վրա հիմնված թեստերի, որոնք միջինում տևում են: մի քանի ժամ հիվանդության հայտնաբերման համար:
***
Հիշատակում:
1. ԱՀԿ, 2020. Լաբորատոր թեստավորման ռազմավարության առաջարկություններ COVID-19-ի համար։ Միջանկյալ ուղեցույց. 21 թվականի մարտի 2020։ Հասանելի է առցանց՝ հասցեով https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf Մուտք գործվել է 09 թվականի ապրիլի 2020-ին
2. CDC 2020. Տեղեկություններ լաբորատորիաների համար: Լաբորատորիաների միջանկյալ ուղեցույցը հասանելի է առցանց՝ հասցեով https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html Մուտք գործվել է 09 թվականի ապրիլի 2020-ին։
3. ԱՀԿ, 2020. Խնամքի կետի թեստերի օգտագործման վերաբերյալ խորհուրդներ: Գիտական Համառոտ. 08 ապրիլի 2020. Հասանելի է առցանց՝ հասցեով https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 Մուտք գործվել է 09 թվականի ապրիլի 2020-ին։
4. ECDC, 2020. ԵՄ/ԵՏԱ-ում COVID-19 ախտորոշման արագ փորձարկման իրավիճակի ակնարկ: 01 ապրիլի 2020. Հիվանդությունների կանխարգելման և վերահսկման եվրոպական կենտրոն. Հասանելի է առցանց՝ հասցեով https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea Մուտք գործվել է 09 թվականի ապրիլի 2020-ին
***
